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解析濱松MAICO共聚焦模塊的分辨率特性

2024-07-22

瀏覽量(748)

眾所周知,共聚焦顯微鏡通過針孔設計有效過濾焦平面以外的光,顯著提升了對比度和分辨率。針對用戶常問的“濱松共聚焦模塊MAICO分辨率是多少?”的問題,本文將進行詳細解答。

1.      MAICO分辨率概述

 

由于分辨率是由整個光學系統決定的,而MAICO模塊本身不帶光路,因此沒有單獨的分辨率概念。其分辨率需結合物鏡和放大倍率來考慮。

 

等效像素尺寸說明

有些客戶可能實際關心的是等效像素尺寸,MAICO的等效像素尺寸為6.25 μm。

 

分辨率公式:寬場顯微鏡VS共聚焦顯微鏡

濱松共聚焦模塊MAICO的XY方向分辨率最大可達到120-200 nm之間,Z軸可達到250-400 nm(以100× NA1.5為例),具體數值依激光波長不同而有所變化。

 

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顯然,共聚焦顯微鏡分辨率顯著高于寬場顯微鏡。

*有需要詳細分辨率數據的客戶可以下載濱松推出的MAICO Resolution Simulator方便地進行查詢各種條件下MAICO可以達到的分辨率。掃碼下載。

 

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或者復制如下鏈接進入下載頁面:https://www.hamamatsu.com/jp/en/product/life-science-and-medical-systems/mems-confocal-unit/resolution-simulator.html

在輸入物鏡規格和激光通道后,就可以得出三種針孔對應的AU以及XY-Z方向的分辨率。

 

2.      針孔尺寸與圖像質量的平衡

 

為了達到最佳的分辨率,理論上針孔尺寸應當越小越好,不過為了在分辨率和圖像靈敏度兩者之間取得平衡,可以適當地設置針孔尺寸以達到最合適的圖像質量。

 

針孔尺寸的選擇

MAICO為每個通道設置了三檔可選的針孔尺寸:S(?。(中)、L(大)。

弱熒光樣品:推薦使用L(大)針孔,以提高圖像信噪比。

強熒光樣品:推薦使用M(中)或者S(?。┽樋?,以獲得更高的分辨率。

 

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物鏡選擇建議

由于光學設計方面限制的原因,我們推薦使用20-100倍的物鏡,且物鏡NA與放大倍率m滿足如下關系:

 

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其中,NA為數值孔徑,m為放大倍率。

通過合理配置物鏡、放大倍率和針孔尺寸,濱松共聚焦模塊MAICO能夠提供卓越的分辨率和圖像質量,滿足各種科研和應用的需求。利用MAICO Resolution Simulator工具,用戶可以輕松查詢并優化其共聚焦系統的分辨率。

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